天疱疮患者血清白介素－6、肿瘤坏死因子－α的检测分析

天疱疮患者血清白介素－6、肿瘤坏死因子－α的检测分析

中华皮肤科杂志 1999年第4期第32卷 论著

作者：周淑华　林麟　培英　王海燕　胡涛　高美华　王峰来　桑红桂

单位：210042南京，中国医学科学院　中国协和医科大学皮肤病研究所(周淑华　林麟　靳培英　王峰来　桑红桂)；山东滨州医学院免疫学研究室(王海燕　胡涛　高美华)

关键词：天疱疮白细胞介素－6肿瘤坏死因子

　　【摘要】目的　探讨白介素－6(il-6)、肿瘤坏死因子－α(tnf-α)在天疱疮发病机理中的作用以及患者血清中这2种细胞因子水平与天疱疮病情的关系。方法　用双抗体夹心elisa法检测了26例寻常型天疱疮(pv)，14例红斑型天疱疮(pe)患者治疗前、8例经有效治疗皮损全部消退的pv患者及23例正常人血清中il-6、tnf-α水平，并测定了4例pv患者治疗前疱液中il-6、tnf-α水平。结果　天疱疮患者治疗前血清中il-6、tnf-α水平显著高于健康对照组(p＜0.01)；2种细胞因子水平均与皮损面积呈正相关(p＜0.01)；随皮损消退其水平降低(p＜0.05)。4例pv患者疱液中il-6、tnf-α水平均高于相应血清中水平。结论　天疱疮患者血清中il-6、tnf-α水平与天疱疮病情活动性相关.il-6、tnf-α可能参与了开疱疮的发病。

interleukin-6 and tumor necrosis factor-α in sera

　　of patients with pemphigus

zhou shuhua, lin lin, jin peiying,et al.

　　institute of dermatology, chinese academy of medical sciences,

　　peking union medical college, nanjing 210042

　　【abstract】objective to elucidate the role of interleukin-6 (il-6) and tumor necrosis factor-α(tnf-α) in the pathogenesis of pemphigus, and to find out the relationship between the two cytokines and the activity of the disease.methods the serum levels of il-6, tnf-α were determined by double antibody sandwich enzyme-iked immuno sorbant assay (elisa) in 26 patients with pemphigus vulgaris (pv) and 14 patients with pemphigus erythematosus (pe) prior to treatment, in 8 pv patients after complete clearing of the skin lesions and in 23 normal controls. the levels of il-6 and tnf-α were also tested in the blister fluid obtained from 4 pv patients at the same time when the serum samples were taken.results the results showed that the serum levels of il-6 and tnf-α were significantly higher in patients with pemphigus than that in normal controls (p＜0.01). a significant correlation was found between the serum levels of il-6 and the total area of lesions for each patient (p＜0.01). theserum levels of the two cytokines declined as the skin lesion had completely disappeared (p＜0.05). the levels of both il-6 and tnf-α in the blister fluid of 4 pv patients were higher than that in the serum samples obtained at the same time.conclusion the results indicate that there is a relationship between the serum levels of il-6 and tnf-α and the activity of pemphigus. theresults also suggest that il-6 and tnf-α play an important role in the pathogenesis of pemphigus.

　　【key words】 pemphigus interleukin-6 tumor necrosis factor

　　天疱疮为一少见的自身免疫性大疱性皮肤病。抗表皮细胞间物质的自身抗体与表皮角质形成细胞桥粒芯蛋白结合，导致表皮棘层松解。抗体的致病性已被证实[1]。在天疱疮发病机理方面，过去对抗原抗体反应研究较详细，而细胞免疫在发病机理中的作用不清楚。近年来研究发现细胞免疫可能参与了天疱疮的发病[2，3]。研究天疱疮患者血清中细胞因子，可更全面地认识天疱疮发病中免疫学机理。本研究用夹心elisa法测定了26例寻常型天疱疮(pv)，14例红斑型天疱疮(pe)患者治疗前血清中白介素－6(il-6)与肿瘤坏死因子－α(tnf-α)水平，并对8例经有效治疗皮损消退pv患者的血清il-6、tnf-α水平及4例pv患者疱液中il--6、tnf-α水平进行了检测，以探讨它们在天疱疮发病机理中的作用，以及患者血清中il-6、tnf-α水平与病情的关系。

　　材料与方法

　　(一)研究对象：病例为1995年1月至1998年5月本所医院门诊或住院的部分天疱疮患者，临床资料完整，共40例，其中男25例，女15例，年龄17～83岁。pv组26例，符合pv典型的临床表现与组织病理学特点；pe组14例，符合pe典型的临床表现与组织病理学特点。所有患者均经直接免疫荧光证实诊断。33例患者经间接免疫荧光检测了循环天疱疮抗体滴度。治疗前仔细体检，依据天疱疮类型、皮损面积占体表面积百分率、有无粘膜损害等给予不同剂量的皮质类固醇治疗。于治疗前及皮损消退时采血，用于检测il-6、tnf-α水平。治疗前4例pv患者，于采血同时抽取完整水疱疱液进行检测。正常对照组为健康体检者，共23例。其中男15例，女8例，年龄19～71岁。

　　(二)研究方法：

　　标本采集：晨空腹常规静脉采血，分离血清，－20℃保存待测。疱液采集：常规消毒皮损，无菌注射器抽取疱液，2000r/min离心10min，收集上清液，－20℃保存待测。

　　实验方法：il-6、tnf-α酶标试剂盒购自第四军医大学免疫学研究室。采用酶标双抗体夹心elisa法检测血清及疱液中il-6、tnf-α水平。用美国产multiskan全自动酶标仪，输入标准浓度后，测吸光度，绘制标准曲线，自动计算出待测样品含量。

　　统计学方法：因不能确定所测结果的分布类型，数据以中位数、范围表示。结果采用非参数秩和检验与spearman等级相关分析。

　　结果

　　(一)天疱疮患者血清il-6、tnf-α水平显著高于对照组。经秩和检验，u值分别为4.54与3.02，p＜0.01, 见表1。pv组与pe组治疗前血清il-6水平、tnf-α水平差异无显著性4例pv患者完整水疱疱液中il-6、tnf-α水平均高于相应血清中含量。

　　讨论